1st Strand cDNA Synthesis Kit w/o Primer
货号 / 型号：KCH-RT001
基于 M-MLV Reverse Transcriptase 的第一链 cDNA 合成试剂盒，由 M-MLV Mix 与 5×RT-qPCR Buffer 两部分组成。 本产品不含 Oligo(dT) 及随机六聚体引物，适用于基因特异性引物（GSP）驱动的逆转录反应，可在更短时间内高效合成 cDNA，支持高温逆转录以提升复杂模板（高 GC、二级结构）的转录效率。 合成的第一链 cDNA 可用于第二链合成、杂交、PCR 扩增、全长 cDNA 文库构建及 Real Time PCR 基因表达分析。
产品介绍
产品简介
1st Strand cDNA Synthesis Kit w/o Primer 是基于 M-MLV Reverse Transcriptase 的第一链 cDNA 合成试剂盒。该产品由 M-MLV Mix 和 5×RT-qPCR Buffer 两部分组成：M-MLV Mix 主要包含 MMLV 反转录酶、RNase Inhibitor 及酶稳定剂；5×RT-qPCR Buffer 包含 dNTP Mixture、Mg²⁺ 等组分。本产品能在更短时间内合成 cDNA，通过提高耐热性使逆转录反应可在较高温度下进行，在使用基因特异性引物（Gene Specific Primer）时，可显著提升合成效率与特异性。
产品特点
- 双组分设计：M-MLV Mix + 5×RT-qPCR Buffer，组分清晰，操作简便
- 不含引物：未提供 Oligo(dT) 和随机六聚体，灵活搭配用户自备引物
- 支持 GSP 策略：正向/反向基因特异引物协同，提升靶向逆转录效率
- 耐高温逆转录：复杂二级结构或高 GC 模板可升至 55℃ 以提高产量
- 应用广泛：适用于 2nd strand 合成、杂交、PCR、全长 cDNA 文库及 RT-qPCR
产品组成
货号产品名称组成规格KCH-RT0011st Strand cDNA Synthesis Kit w/o PrimerM-MLV Mix
5×RT-qPCR Buffer500 μL × 2
注：本产品未提供 Oligo(dT) 和随机六聚体引物。
基因特异性引物使用方法
1. 试剂准备：将各组分解冻，轻柔混匀并短暂离心后使用，建议在冰上配制反应体系。
2. 反应体系（25 μL）
组分添加量终浓度5×RT-qPCR Buffer5 μL1×M-MLV Mix5 μL1×10 μM 正向基因特异引物0.5 μL0.2 μM10 μM 反向基因特异引物0.5 μL0.2 μMRNA 模板按需求添加—ddH₂O加水至 25 μL—
* 基因特异引物和模板加样量可根据实际情况调整。
3. 反应程序
温度时间25℃5 min50℃45 min85℃5 min
* 模板具有复杂二级结构或高 GC 区域时，可将反应温度提高至 55℃，有助于提高产量。
4. 操作提示：盖上反应管，轻柔混匀，可短暂离心确保反应液在管底；将反应体系置于 PCR 仪中开始反应。
5. 产物保存：cDNA 可立即用于 qPCR；或于 -20℃ 保存并在半年内使用；长期存放建议分装后于 -70℃ 保存，避免反复冻融。
规格参数
货号：KCH-RT001 规格：M-MLV Mix 500 μL + 5×RT-qPCR Buffer 500 μL 储存：-30 ~ -15℃，可保存 1 年
